顯微鏡能夠觀察立體像并不太困難,實際上把兩個功能獨立的叢微鏡使其光鈾以一定小的角度(一般12—14°)連接在一起就可以構(gòu)成“臺實體顯微鏡。比較原始類型的文體顯微鏡(圖12.4)就是如此,它具有兩套明確分離的物鏡、鏡簡和目鏡。當(dāng)然對于立體效果來說,兩個分離的鏡筒或兩個分離的物鏡并不一定是必需的。只要一個物鏡具有足夠大的孔徑能夠允許互成12一l4。角度的兩束光線進入,那么使用—個物鏡和鑰筒就可以了,實際上大多數(shù)現(xiàn)代的實體顯微鏡都是單物鏡和單鏡簡類型的。
它有一個比較穩(wěn)同曲鏡座,鏡體被固定齊鏡柱上,物體的聚焦只通過一個粗調(diào)旋鈕而進行,這對于使用較大約場保和較低的放大倍數(shù)觀察物體的立體結(jié)構(gòu)來說*夠用了。文體顯微鏡具行較大的自由工作距離,一般為8一12cm,這對于觀察各種樣品來說也*足夠了。在鏡座上有一個圓形的載物板,可以放置被觀察的樣品。——般載物板一面是白色的,另一面是黑色的,燈以根據(jù)所觀察樣品的顏色選用,以達到良好的反差效果。觀察使用雙目鏡筒時,兩個目鏡簡之間的距離可以根據(jù)觀察者兩眼瞳孔間的距離進行調(diào)節(jié)。
生物顯微鏡總放大倍數(shù)的變換,雖然也可以通過更換物鏡而實現(xiàn),僅達只是在比較原始類型的鏡臺中,例如在Grceenough型實體顯微鏡中具有一個滑動型的物鏡更換裝置,但是由于機械原因及物鏡的大孔徑,很少使用可轉(zhuǎn)動的物鏡轉(zhuǎn)換臺。在現(xiàn)代的生物顯微鏡中,放大倍數(shù)的改變是迥過——個可變焦的透鏡系統(tǒng)實現(xiàn)的,關(guān)于這種可變焦透鏡系統(tǒng)的光學(xué)原理已經(jīng)在第四章中講述過了,它通過在一組透鏡系統(tǒng)巾改變中間透鏡的位置,來改變放大倍數(shù)的。這種中間透鏡位置的改變是通過調(diào)節(jié)放大倍數(shù)旋鉗來進行的。在一般的生物顯微鏡中,具有6x、12x、25x、50x幾個放大倍數(shù)的選擇到度。所使用的常用目鏡有10x、15x、20x等幾種,這樣,生物顯微鏡的總放大倍數(shù)在60一1,ooox的范圍之內(nèi)。實際上對于立體現(xiàn)察來說,使用太高的放大倍數(shù)時由十場誅的減小,立體效果就會喪失,這種像就會變成物體的薄光學(xué)切面,其結(jié)果在深度上的差異(這對于立體現(xiàn)察來說是必需的)就不可能被辨認,因此觀察標本立體結(jié)構(gòu)只能使用較低的放大倍數(shù)。對于較大的標本,如果60x的zui小總放大倍數(shù)仍然嫌大,可以再使用一個o.4x的附加物鏡,使總放大倍數(shù)減小到24x,而使物場的直徑由原來的;3.8mm可以增大到88.2mm。與此相反,還可以使用1.6x的附加物鏡,來進一步增大總放大倍數(shù)。表14中列出了常用的目鏡和可變焦透鏡系統(tǒng)(以及附加物鏡)各種組合時的總放大倍數(shù)以及物場直徑。
顯微鏡中形成的像同物體相比是倒立的,在生物顯微鏡中,這種例立像對于標本的解創(chuàng)或移動操作來說是不太方便的,當(dāng)一個指針從左下方指著標本時,在顯微鏡中觀察就像是指針來自右上方。為了解決這一問題,所有的實體顯微鏡都裝置了一套倒轉(zhuǎn)棱鏡,使形成的倒立像再次倒轉(zhuǎn)成一個直立像。這種像的例轉(zhuǎn)在一般顯微鏡中是不必要的,而且會引起光能的損失和成像質(zhì)量的降低。